新型冠狀病毒PCR實(shí)驗(yàn)室解決方案

自新型冠狀病毒發(fā)現(xiàn)以來，特別是PCR實(shí)驗(yàn)室新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作任務(wù)艱巨。先介紹一下PCR檢測(cè)的流程：

1試劑制備區(qū)

功能：主要是作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備，試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料需貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。所需要的儀器設(shè)備：

天平（用于精確稱量各類試劑）→超凈工作臺(tái)（涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成）→移液器（準(zhǔn)確量取特定體積溶液20-100ul）→純水（超純水18.2ΩM.CM）→藥品冷藏箱（短期保存  ）→試劑低溫冰箱（可選2-8°、-20℃）→混勻儀（移取樣本前需要混勻）（推薦艾本森品牌：MixMax漩渦混勻儀）→消毒車（空間環(huán)境消毒）→滅菌鍋（實(shí)驗(yàn)室物品、試劑、培養(yǎng)基消毒滅菌）→PH計(jì)（配置試劑是精確測(cè)量PH值）  

2 樣本制備區(qū)

功能：臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)DNA的合成。所需要的儀器設(shè)備

生物安全柜（為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴(kuò)散）→樣本低溫冰箱（-20℃，-80℃保存樣本及DNA）→高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)（用于收集微生物菌體、細(xì)胞碎片以及其他沉淀物，有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定，需要低溫環(huán)境）→恒溫金屬浴（用于DNA雜交過程中水浴控溫）（HtPot40恒溫金屬?。?/span>→移液器（準(zhǔn)確量取特定體積溶液）→紫外燈或者消毒車（空間環(huán)境消毒）→混勻儀（移取樣本前需要混勻）（推薦艾本森品牌：MixMax漩渦混勻儀）→超凈工作臺(tái)（涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成）→低溫?fù)u床（用于大腸桿菌和酵母菌的振蕩培養(yǎng)）→磁力攪拌器(加速溶解固體內(nèi)容物 )

3核酸擴(kuò)增區(qū)

功能：主要是DNA擴(kuò)增，已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應(yīng)混合液，制備成反應(yīng)混合液等，也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在PCR測(cè)定中，通常在擴(kuò)增后須打開反應(yīng)管。

基因擴(kuò)增儀   （基因檢測(cè)DNA/RNA擴(kuò)增）→熒光定量PCR儀（核酸定量分析）→核酸提取儀（樣品DNA/RNA提?。?/span>→移液器（準(zhǔn)確量取特定體積溶液）→紫外燈或者消毒車   （空間環(huán)境消毒）→超凈工作臺(tái)（涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成   ）→純水裝置（用于PCR，DNA測(cè)序需要超純水）

4產(chǎn)物分析區(qū)

功能：主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定，如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè)，需要儀器設(shè)備：

基因擴(kuò)增儀  （基因檢測(cè)DNA/RNA擴(kuò)增）→熒光定量PCR儀（核酸定量分析）→核酸提取儀（樣品DNA/RNA提取）→移液器（準(zhǔn)確量取特定體積溶液）→紫外燈或者消毒車 （空間環(huán)境消毒）→超凈工作臺(tái)（涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成   ）→純水裝置（用于PCR，DNA測(cè)序需要超純水

電泳儀（水平電泳用于核酸DNA/RNA檢測(cè)，垂直電泳用于蛋白檢測(cè)，轉(zhuǎn)印電泳用于將蛋白轉(zhuǎn)印到膜上做western檢測(cè)）→凝膠成像系統(tǒng)/紫外檢測(cè)儀（用于核酸瓊脂電泳和蛋白聚丙酰胺的觀察和拍照，紫外分析儀用于染色后核酸瓊脂電泳膠觀察，不能連接電腦）→電爐（電泳瓊脂凝膠加熱融化）